1. 적용범위
화장품, 피부외용제 및 여기에 사용되는 기제, 첨가약제, 색재, 향료의 피부 누적 자극성 테스트에 적용한다.
2. 목적
이 테스트 방법은 피부에 대하여 약한 자극성 물질의 1차 자극성 및 연속사용에 따른 누적 자극성을 평가하는 것을 목적으로 한다.
3. 시료
약 5.0g 혹은 약 5.0ml의 시료를 필요로 한다.
4. 실시법
(1) 시험에는 체중 300-500g의 건강한 Hartley 계 알비노 몰모트 (이하 몰모트라 한다)의 수컷 3마리를 사용한다.
(2) 먼저 전기 세발기로 등의 털을 깍는다.
(3) 시료가 액체인 것은 0.3ml, 고체인 것은 0.3g을 취해 몰모트의 오른쪽에 약 3*4cm 범위에 유리봉으로 균일하게 도포한다. 왼쪽은 대조로 한다.
(4) 시료를 도포한 몰모트는 각 사육상자에 1마리씩 수용한다.
자유로이 섭취할 수 있도록 한다.
(5) 도포 24시간 후에 별항의 판정기준에 따라 피부반응을 판정한다.
판정 후 앞서와 같은 방법으로 동일부위에 2번째의 도포를 실시한다.
48시간 후에도 피부반응을 판정하고 3번째의 도포를 실시한다.
이렇게 하여 72시간 후에 최종판정을 한다.
(6) 시험기간중은 매일 동물의 체중 및 건강상태를 관찰 기록한다.
(7) 육안판정과 동시에 조직학적으로 판정하는 경우도 있다.
5. 판정
피부반응의 판정은 밝은 장소에서 다음 판정기준에 따라 육안으로 실시한다.
판정기준
| 반 응 |
평 가 |
| 전혀 변화를 확인할 수 없는 것 |
0 |
| 약간의 홍반이 확인되는 것 |
1 |
| 명백히 홍반을 확인할 수 없는 것 |
2 |
| 심한 홍반이 있고 약간의 부종과 가피의 확인을 할 수 있는 것 |
3 |
| 명백한 부종, 가피가 있거나 그 이상의 변화를 확인할 수 있는 것 |
4 |
실험도중에 병사한 것과 병든 것은 판정에서 제외한다.
평가점 산출방법
시험동물의 피부반응 총계
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3(시험동물수)*3(피부반응 판정일수)
시료의 평가
본 시험법에 의한 시료의 최종평가는 아래 기준에 따른다.
| 반 응 |
평 가 |
|
합격범위
(단 3일째의 판정 총합점이 8이상인 것은 불합격) |
0 - 2 |
| 재검토 |
2.1 - 2.5 |
| 불합격 범위 |
2.6 - 4 |
판정에는 조직 소견을 병용하는 경우도 있다. |
